Culture cellulaire

Origine des cellules

Les cellules mises en culture peuvent être:

des micro-organismes libres (bactériess ou levure)
des cellules 'saines' prélevées fraîchement d'un organisme (biopsie,...), on parle alors de 'culture primaire'. Ces cellules ne peuvent habituellement pas être maintenues en culture indéfiniment, notamment à cause de leur nombre limité de divisions (limite de Hayflick).
des cellules ayant une capacité de division non limitée (on parle d''immortalité en culture'). Ce sont des lignées cellulaires. Les lignées sont soit des cellules cancéreuses, soit des cellules en voie de cancérisation, soit des cellules saines rendues 'immortelles' artificiellement.
Des tranches d'organes (d'épaisseur optimisée selon le tissu)

Étapes générales de la culture cellulaire

On décongèle une ou plusieurs ampoules de cellules. Cette ampoule contient des cellules dans un milieu de culture adapté + un agent protecteur (qui permet d'éviter une trop grande mortalité lors de la congélation). Apres la décongelation on élimine l'agent protecteur (DMSO par exemple, qui est d'autre part toxiques pour les cellules)par centrifugation puis, on rajoute alors du milieu de culture adapté frais. Enfin, on remet les cellules à l'incubateur pour les cultiver.

Culture des micro-organismes

La plupart du temps, les micro-organismes sont cultivés en suspension dans un milieu de culture ou sur un support nutritif semi-solide dans des boîtes de Petri. Les conditions physicoss-chimique de croissance des bactéries en culture varient beaucoup, aussi bien en terme de température, pression atmosphérique, salinité du milieu, composition en biomolécules, et même parfois luminosité (exemple de certaines cyanobactéries).

Voir aussi l'article sur la culture microbiologique.

Culture des cellules animales

Les cellules animales sont généralement cultivées en incubateurs, à une température de 37°C et dans une atmosphère très humide à teneur en CO2 contrôlée, souvent 5%.

Certaines cellules sont cultivées en suspension dans leur milieu nutritif (cellules non-adhérentes), d'autres sur des plastiques traités leur offrant des capacités d'adhérence. Ces supports peuvent prendre la forme de boîtes de différents formats ou de 'flasks'.

Des techniques particulières de culture peuvent être appliquées à certaines cellules, soit de façon obligatoire pour leur survie, soit pour améliorer ces conditions ou le contrôle de certains paramètres lors des expériences:

optimisation des conditions 'atmosphériques' (ajout d'oxygène...)
optimisation de la composition des milieux nutritifs (ajout de certaines hormones,...)
optimisation des supports (composition en biomolécules,...)
culture sous agitation
co-culture avec des cellules 'nourricières'
culture sur des tissus préalablement 'tués' par un procédé de congélation/décongélation
inclusion dans des gouttelettes d'alginate
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